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        某規模化豬場豬瘟血清抗體水平檢測研究

        時間:2020-03-11 來源:吉林農業大學 作者:王巖 本文字數:5606字
          摘 要
          
          在吉林省長春市對某規模化豬場的豬瘟抗體水平檢測、仔豬不同免疫程序下的抗體水平差異和仔豬母源抗體消長規律分析,制定出一份適合該豬場非典型豬瘟的綜合防控建議與對策,并在豬場進行推廣應用。
          
          豬瘟血清抗體水平檢測:對某規模化豬場進行現場調查,隨機對被調查豬場不同生長階段的豬采血,用豬瘟病毒 ELISA 試驗進行豬瘟抗體檢測。該豬場的豬群未出現陰性病例,免疫效果良好;懷孕母豬的抗體有效阻斷力最高,達 68%;育肥肉豬陽性和有效阻斷均占 45%;哺乳母豬有效阻斷的比例相對降低;哺乳仔豬攜帶有母源抗體,有效阻斷率達 56%。規模化豬場穩定生產與持續發展是以該豬場種豬群的穩定性(后備母豬、懷孕母豬和哺乳母豬)為前提,豬場豬瘟控制情況,直接關系到整個豬群的健康狀況。

        某規模化豬場豬瘟血清抗體水平檢測研究
          
          仔豬豬瘟母源抗體消長規律研究:仔豬出生后母源抗體水平較高,在 30 日齡之前,母源抗體水平都保持在保護率臨界值 80%以上,30 日齡后抗體水平開始降低,抗體水平降低速率隨著日齡的增加而加快,當 50 日齡時,仔豬的抗體水平已經降低到了 5%。本試驗中設置為仔豬在 25 日齡斷奶,所以母源抗體水平在 25 日齡后下降的速度加快,從母源吸收抗體減弱。鑒于豬場的現有情況,如果仔豬不采用超前免疫,25-30 日齡之間為較佳的豬瘟疫苗免疫時間。
          
          不同免疫程序對仔豬豬瘟抗體水平影響:I 組仔豬分別于 0 日齡、40 日齡注射豬瘟兔化弱毒疫苗 1 頭份/頭,為超前免疫組,II 組仔豬的時間分別于 25 日齡、60 日齡注射豬瘟兔化弱毒疫苗 1 頭份/頭,為正常免疫組。其他疫苗的免疫程序不變。試驗 I 組仔豬樣本豬瘟抗體水平隨著仔豬日齡的增長,豬瘟抗體水平呈現出逐漸遞增趨勢,130 日齡的平均阻斷率已高達 66.4%,陽性。試驗 II 組仔豬在80 日齡前的豬瘟抗體水平呈現出逐步上升趨勢,但在 100 日齡后抗體水平逐漸下降,但豬瘟抗體阻斷陽性率達到 100%,這說明兩種免疫程序均能滿足試驗豬場預防豬瘟病毒的要求,I 組優于 II 組。
          
          根據本文對某規模化豬場的流行病調查結果,根據豬場的實際情況制定該豬場非典型豬瘟綜合防控建議與對策,提高該豬場的豬瘟防控。本文可以為養豬生產實踐中防制非典型豬瘟提供理論依據,為控制預防豬瘟提供參考。
          
          關鍵詞:豬瘟;抗體;檢測;免疫;防控。
          
          Abstract
          
          The epidemiological analysis of swine fever in Suckling sows, reserve sows,piglets and fattening sows was carried out in a large-scale pig farm in changchun, jilin province. Combined with the monitoring of the antibody level of CSFV in alarge-scale pig farm, the antibody level differences of piglets under different immunization procedures and the fluctuation and growth rules of maternal antibodies of piglets, a comprehensive prevention and control proposal and countermeasures suitable for CSFV in this pig farm were worked out, and the application was promoted in the pig farm.
          
          Monitoring of serum antibody level of CSFV: an on-site investigation was conducted on a large-scale pig farm. Blood samples were collected randomly from pigs at different growth stages of the pig farm under investigation, and the CSFVELISA test was used to detect the antigen of CSFV. No negative cases were found in the pig herd of the pig farm, and the immune effect was good. The antibody of pregnant sows had the highest blocking effect (68%).The positive and effective blocking of fattening pigs were 45%.The effective blocking rate of Suckling sows was relatively reduced. Suckling piglets were found to have maternal antibodies, with an effective blocking rate of 56%.The stable production and sustainable development of large-scale pig farm is based on the stability of the breeding pig herd (reserve sows,pregnant sows and lactating sows) of the pig farm. The control situation of swine fever in the pig farm is directly related to the health status of the whole pig herd.
          
          Piglets swine fever rules of maternal antibody typical in the study: piglet birth stepmother source antibody level is higher, before the age of 30, maternal antibody levels remain in which critical value by more than 80%, antibody levels started to reduce after 30 days of age, the antibody levels drop rate increased with the increase of age, when 50 days of age, the antibody level of piglets is down to 5%.In this experiment, piglets were set to be weaned at the age of 25 days, so the decline rate of maternal antibody level was accelerated after the age of 25 days, and the absorption of antibodies from the maternal source was weakened. In view of the current situation of pig farms, if piglets do not adopt advanced immunization, 25-30 days is a better immunization time for CSFV.
          
          Effect of different immunization procedures on the antibody level of swine fever:piglets in group I were injected with 1 dose of rabbit attenuated vaccine of swine fever at 0 and 40 days of age, respectively, in the advanced immunization group; piglets in group II were injected with 1 dose of rabbit attenuated vaccine of swine fever at 25 and 60 days of age, respectively, in the normal immunization group. The immunization procedures for other vaccines remain unchanged. With the increase of piglets' age, the antibody level of CSFV in group I showed a gradually increasing trend, and the average blocking rate of 130 days was as high as 66.4%, which was positive. The antibody level of piglets in the test group II showed a gradually increasing trend before 80 days of age, but gradually decreased after 100 days of age,but the positive rate of blocking the antibody against CSFV reached 100%, indicating that the two immune programs could meet the requirements of preventing CSFV in the pig farm, and group I was superior to group II.
          
          According to the epidemiological investigation results of a large-scale pig farm in this paper, Suggestions and countermeasures for the comprehensive prevention and control of atypical swine fever in the pig farm were formulated according to the actual situation of the pig farm, so as to improve the prevention and control of swine fever in the pig farm. This paper can provide theoretical basis for the prevention and control of atypical swine fever in pig production practice, and provide reference for the control and prevention of swine fever.
          
          Keywords:CSF;Antibody; Monitoring; Immune; prevention and control。
          
          前 言
          
          吉林省為全力推進率先實現畜牧業現代化,大力發展標準化規模養殖,提高畜禽的飼養水平,加強建設高質量和安全的畜禽育種基地,并促進從自由放養的養殖規模向標準示范轉型升級。嚴格控制動物衛生防疫工作,持續抓好豬傳染性疾病的防控工作,大力宣傳豬傳染性防范知識,實施動物疫病凈化計劃,推動動物疫病防控從有效控制向逐步凈化消滅轉變。
          
          豬瘟(Hog cholera,HC),俗稱豬霍亂或豬腸瘟,這種高度接觸性傳染病是由豬瘟病毒(HCV,CSFV)引起的,最早出現在美國,隨后很快傳播至全世界。
          
          一旦生豬感染豬瘟病毒,為嚴防病原傳播,只能對病豬進行銷毀,治愈后的豬只能自產自銷,所以過去幾十年里,高發的豬瘟病毒導致我國生豬及其產品出口率降低,國際市揚的占有率較低,造成嚴重的經濟損失。
          
          隨著我國疫苗防疫事業的不斷發展,逐漸攻克豬瘟病毒免疫問題,豬瘟疫苗在規模化豬場進行接種后,顯著降低豬瘟發生發病率,效果明顯。1954 年,我國首次成功研發豬瘟兔化弱毒株,1956 年,我國開始推廣使用自主研發的中國系(C 系)豬瘟兔化弱毒疫苗。從 1957 年起,中國系疫苗免疫效果被國際認可,逐步推廣至歐洲、亞洲很多國家,促進歐亞的這些國家的豬瘟得到控制或消滅。但是,近些年來,由于環境、氣候等因素,豬瘟病毒也發生變異,并且帶毒母豬、動物不規律流動、疫苗儲存不當、免疫不當及各種不可控的原因的存在。隨著豬瘟病毒的不斷變異,我國的逐漸出現 CSFV 非典型豬瘟,病程發展緩慢,不易被發現,出現繼發感染或擴散的趨勢,直接影響豬場效益,后果不堪設想。
          
          近年來,雖然我國執行了多年的豬瘟強制免疫策略,但是受到諸多因素的制約,導致豬瘟防控壓力增大,雖然近年來有關 CSFV 豬瘟的大規模發病鮮有報道,但是,豬瘟病毒的潛在病原依然存在。由此,豬群中母豬群必須經過嚴格的免疫程序。我國加大畜牧業管控力度,在規模化豬場嚴格控制動物衛生防疫工作,對豬場工作人員宣傳講解豬傳染性防范知識,有效提高豬場豬群的抗體阻斷率和抗體陽性率。
          
          因此,在吉林省長春市某規模化豬場開展非典型豬瘟的流行病學調查及分析,了解豬瘟在該規模化豬場的流行情況,仔豬的抗體水平,以期提供有針對性的免疫防控策略,為規模化豬場豬瘟疫苗接種提供理論支撐。
          
          第一篇 文獻綜述
         
          
          第一章 豬瘟的概述。
          
          1.1 豬瘟。

          
          豬瘟(Hog cholera,HC),俗稱豬霍亂或爛腸瘟,這種高度接觸性傳染病是由豬瘟病毒(HCV,CSFV)引起的,急性癥狀進一步表現為高燒、厭食、嗜睡、結膜炎、呼吸系統癥狀和便秘伴腹瀉,中度和低毒菌株產生一種更難識別為腦脊液的疾病。HC 最早出現在美國,隨后很快傳播至全世界,也被稱為古典豬瘟(Classical Swine Fever,CSFV)。由于其傳播范圍廣,致死率高等特點,給生豬養殖業帶來了較大的經濟損失,世界各國都對豬瘟十分關注。國際獸醫組織(Office International Des Epizooties,OIE)高度重視,將其列入了 A 類或一類,是 16 種法定傳染病之一。我國作為畜牧業大國,曾經是豬瘟(HC)流行較為嚴重的國家之一,國家農業部也按照疫病流行程度及其危害程度,根據國際 OIE的分類標準將其列入了一類疫病范圍。
          
          1.2 豬瘟病毒。
          
          豬瘟(HC)的病原體,為豬瘟病毒(CSFV),宿主是生豬和野豬,屬于黃病毒科,瘟病毒屬。1940 年以來,牛病毒性腹瀉、牛粘膜病以及羊邊界病這三種反芻動物的疾病被確定為病毒病,且致病病毒與 CSFV 病毒特征相似。根據這些病毒在序列上的同源性及基因組構成的相似性,這些病毒被歸類為黃病毒科瘟病毒屬[1]。CSFV 的病毒粒子是一種包含糖基化膜蛋白和二十面體核衣殼的包膜,病毒顆粒形狀為球形,直徑大約為 34~50nm,有不明顯的膜粒,一層結合牢固的類脂囊膜,核衣殼可能為二十面體對稱,病毒表面包裹有 6~8nm 類似穗樣的突起[2]。
          
          CSFV 整個病毒基因組長度大約 12.3 kb,為單鏈陽性 RNA[3, 4],這個 CSFV的全基因組僅有一個單獨的開放式閱讀框(ORF),兩側即為 5'和 3'未翻譯區域(UTR),豬瘟病毒基因組 5'端非翻譯區缺少一個 5'甲基化的“帽子”結構,包含一個內部核糖體進入位點(IRES)[5, 6]。豬瘟病毒(CSFV)3'非編碼區不具有任何多聚 A 區。利用宿主翻譯機制,ORF 可以編碼 3898 個氨基酸的長肽 這種多聚蛋白由宿主信號肽酶和 Npro、NS2 和 NS3 蛋白酶對其進行共翻譯和翻譯后修飾,最終產生了不同的病毒蛋白[7, 8]。單個的 ORF 被翻譯成四個結構(C,Erns,E1,E2),和 8 個非結構的病毒蛋白(Npro,P7,NS2,NS3,NS4A,NS4B,NS5A,NS5B)[9, 10]。
          
          
          
          豬瘟病毒的生活史是從宿主細胞的感染開始的,例如隱生的豬的內皮細胞。
          
          豬瘟病毒通過 E1 和 E2 糖蛋白附著在宿主細胞膜上。病毒粒子附著后,病毒可能進入包涵體介導的胞吞作用細胞[11]。糖蛋白在細胞內連續膜融合中起著重要作用,其中 E2 糖蛋白的 129-139 個氨基酸殘基被認為是通過 pH 依賴的酸化參與膜融合。單鏈豬瘟病毒基因組釋放到胞質中后,核衣殼蛋白未被包膜,呈陽性,可用于轉錄和復制[12]。宿主核糖體與豬瘟病毒 RNA 的 5?直接結合并開始翻譯,新生多肽鏈在內質網腔內經過翻譯后的修飾和裂解。豬瘟病毒基因組的復制由NS5B 進行,它是一種核糖核酸依賴的 RNA 聚合酶酶,與 NS5B 一起,病毒復制還受到其他非結構蛋白(即 NS3,NS4A,NS4B 和 NS5A)的介導[13]。
          
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          1.3 豬瘟病毒的傳播方式
          1.4 豬瘟的臨床癥狀和病理變化
          1.5 豬瘟的國外流行現狀及發病特點
          1.6 豬瘟的國內流行現狀及發病特點
          
          第二章 豬瘟疫苗的研究進展
          
          2.1 豬瘟滅活疫苗
          2.2 弱毒疫苗
          2.3 亞單位疫苗
          2.4 基因缺失弱毒疫苗
          
          第二篇 研究內容
          
          第一章 某規模化豬場豬瘟血清抗體水平檢測
          

          1.1 材料
          1.2 方法
          1.3 結果
          1.4 討論
          1.5 小結
          
          第二章 仔豬豬瘟母源抗體消長規律研究
          
          2.1 材料
          2.2 方法
          2.3 結果
          2.4 討論
          2.5 小結
          
          第三章 不同免疫程序對仔豬豬瘟抗體水平影響
          
          3.1 材料
          3.2 方法
          3.3 結果
          3.4 討論
          3.5 小結
          
          第三篇 某規模化豬場非典型豬瘟綜合防控建議與對策
          
          1 養殖觀念的轉變
          2 加強免疫監測
          3 科學飼養
          4 做好疫病監測
          5 加強應急處置,確保豬群安全
         
          結 論

          1.豬瘟群體的免疫抗體的阻斷效果良好;該豬場定期進行豬瘟控制凈化計劃,該生產線的種豬群的 CSF 免疫抗體水平大于 50 的陽性率在 80%以上,說明該豬場豬群未出現帶毒現象,豬瘟隱性感染風險較低。

          2.建議新生仔豬豬瘟疫苗免疫程序采用超前免疫方式,0 日齡超免、30 日齡二免、70 日齡三免。

          3.確定了本豬場仔豬的母源抗體消長規律的最低臨界值的日齡為 30 天;豬場仔豬最佳免疫日齡為 25-30 天之間。

          4.通過本次豬瘟抗體水平檢測與分析,為該豬場的科學飼養提供理論依據,有效預防疾病。

          參考文獻

          王巖. 吉林省某規模化豬場豬瘟抗體水平檢測與分析[D].吉林農業大學,2019.
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